第 四 步

由 Y 计算 Ｘ

1、从Excel表粘贴样品反应值数据，点击“粘贴”；

2、点击“计算”；

3、得到数据；

4、点击“复制”，然后可以粘贴到Excel中，得到计算后的数据

需注意的问题

1、二次曲线计算的结果会有两个解，要舍掉其中一个偏离度大的。

2、Log-logit的拟合方法是用于竞争法的，竞争法也可以用四参数或五参数的方式进行拟合。

3、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。

4、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段，即曲线几乎成直线的范围内。

5、最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，ELISA试剂盒这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。

6、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。

7、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。

8、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数R至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至是0.999。

要想绘制出合格的标准曲线、使用好标准曲线，真心不易，必须将各个方面的条件都考虑进去，即对标准曲线的绘制也实行质量控制，只有这样, 才能得出理想的标准曲线。