当前位置:首页 > 科技 >

您好 能否提供SOD CAT POD MDA的测定方法和具体操作时的注意事项啊(gnps质谱分析平台操作说明)

来源:原点资讯(www.yd166.com)时间:2025-05-27 17:04:36作者:YD166手机阅读>>

您好 能否提供SOD CAT POD MDA的测定方法和具体操作时的注意事项啊,gnps质谱分析平台操作说明(1)

采用NBT法测定SOD酶活性。在黑暗条件下,向小烧杯中分别加入:62.5mmol/l pH7.8磷酸缓冲液4ml、30mmol/ldl-甲硫氨酸0.2ml、3µmol/LEDTA0.1ml、1.125mmol/l NBT0.2ml、60µmol/l核黄素0.2mL,上述提取出的各处理的酶液0.05mL,以不加NBT和酶液但用缓冲液代替的混合液作为校零对照,测最大值时只不加入酶液但用缓冲液补齐,加完所有的物质后,在人工培养箱中用日光灯光照25分钟后,用分光光度计在波长560nm的情况下测定各管的OD值。以能抑制反应50%的酶量为一个SOD单位,其活力可由下面的公式计算:

  SOD活力(U/mg蛋白)= (对照管吸光度-测定管吸光度)/对照管吸光度/

  [(50%)×加入粗酶液中的蛋白质含量(mg)]

  3过氧化物酶(POD)的测定:

  0.05mol/L磷酸缓冲溶液(PBS)(pH=7.0)溶液的配制:10.9251g Na2HPO4•12H2O + 3.042975g NaH2PO4•2H2O,定容到1000ml。

  0.3%H2O2溶液的配制:吸2.5ml 30%H2O2,用0.05mol/L pH=7.0磷酸缓冲溶液(PBS)定容到250ml。

  0.2%愈创木酚溶液的配制:称0.5g愈创木酚,用0.05mol/L pH=7.0磷酸缓冲溶液(PBS)定容到250ml。

  2ml 0.3%H2O2溶液 + 0.95ml 0.2%愈创木酚溶液 + 1ml 0.05mol/L pH=7.0磷酸缓冲溶液(PBS) + 0.02ml??(原来为0.01)酶液(根加0.05ml酶液)(对照用0.05mol/L磷酸缓冲溶液代替酶液)(做三个重复),记录470nm处OD降低速度。将每分钟OD增加0.01定义为1个活力单位。(参考陈建勋,王晓峰主编的《植物生理学实验指导》P121)

  比色时加酶液,混合后即刻计时。

  04级 采用愈创木酚法测定POD酶活性。取光径1cm的比色杯2只,一只中加入反应混合液3mL,62.5mmol/l磷酸缓冲液1ml作为较零对照,另一只中加入反应混合液3mL,62.5mmol/l磷酸缓冲液0.9ml,上述提取得酶液0.1ml,立即开启秒表计时,于分光光度计470nm波长下测定OD值,每隔一分钟读数一次,以每分钟OD变化值表示酶活性大小,即以△OD470/min•mg蛋白质(或鲜重g)表示。

栏目热文

合生元妈妈100是正品吗(合生元官网店靠谱吗)

合生元妈妈100是正品吗(合生元官网店靠谱吗)

是正品合生元妈妈100是合生元旗下的育儿消费服务网站,为充满爱心时尚的妈妈们开辟了宝宝成长记录、经验交流、消费交流、专业...

2025-05-27 16:33:16查看全文 >>

一百多奶粉和价格很高的奶粉有多大区别(价格高的奶粉比价格低的奶粉好吗)

一百多奶粉和价格很高的奶粉有多大区别(价格高的奶粉比价格低的奶粉好吗)

区别还是比较大的:1.有机配方与普通配方差异有机配方奶粉是无添加抗生素、人造肥料、农药等,相对普通配方奶粉要讲究、质量要...

2025-05-27 16:29:14查看全文 >>

羊羊100奶粉质量怎么样(十大最安全奶粉)

羊羊100奶粉质量怎么样(十大最安全奶粉)

质量好。羊羊100是国内最早一批婴幼儿配方羊奶粉品牌,成立至今,凭借着稳定的产品质量和扎实的服务,深受广大家庭的喜爱,曾...

2025-05-27 18:01:26查看全文 >>

波斯王子3宿敌之剑巨人BOOS怎么打(波斯王子3卡bug了怎么解决)

波斯王子3宿敌之剑巨人BOOS怎么打(波斯王子3卡bug了怎么解决)

先在四周找找能上高的地方上到最上面的独木瞬杀他,然后到另一面的独木瞬杀两次瞬杀后巨人的眼睛瞎了后砍脚!砍到脚抬起来了去砍...

2025-05-27 16:45:33查看全文 >>

PSP游戏波斯王子宿敌之剑中第一关求助(psp波斯王子宿敌之剑全流程通关)

PSP游戏波斯王子宿敌之剑中第一关求助(psp波斯王子宿敌之剑全流程通关)

就是进门,在你的右边有个箱子,然后爬上去,往前走要跳,然后沿着走,走到前面有火的地方然后对着墙,往上爬就会有抓的地方然后...

2025-05-27 17:13:55查看全文 >>

思域1.0t车主真实感受(买1.0t思域的后悔了吗)

思域1.0t车主真实感受(买1.0t思域的后悔了吗)

1车辆起步迟顿收油不顺畅2简配很严重缺少实用配置3内饰做工粗糙整车装配差4悬架偏硬隔音效果不理想第十代思域虽然外观劲爆,...

2025-05-27 17:40:13查看全文 >>

思域1.0t到底值不值得入手(思域1.0t车主真实感受)

思域1.0t到底值不值得入手(思域1.0t车主真实感受)

不值得1.0T比起1.5T:(1)动力差远了,这是最关键的(2)内饰也减了。价格仅便宜1.2W对比起速腾、卡罗拉、威朗这...

2025-05-27 17:52:17查看全文 >>

巴特辛普森特点(巴特辛普森经典图片)

巴特辛普森特点(巴特辛普森经典图片)

在《辛普森一家》的头两季 中,巴特是动画的中心角色;后来故事的焦点逐渐地转向了霍默,不过巴特依然是这部动画中的主角之一;...

2025-05-27 16:48:24查看全文 >>

澳大利亚中部是什么气候(澳大利亚的整体气候特点)

澳大利亚中部是什么气候(澳大利亚的整体气候特点)

澳大利亚中部的气候主要是热带沙漠气候。这种气候特点是全年高温少雨,日夜温差较大,以及极端干旱的条件。气候形成原因分析澳大...

2025-05-27 18:03:53查看全文 >>

澳大利亚中部热带沙漠气候的成因(澳大利亚的热带草原气候的形成)

澳大利亚中部热带沙漠气候的成因(澳大利亚的热带草原气候的形成)

(1)、南回归线横贯大陆中部,大部分地区终年受到副热带高气压控制,因气流下沉不易降水。(2)、澳大利亚大陆轮廓比较完整,...

2025-05-27 17:53:05查看全文 >>

文档排行