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枯草芽孢杆菌培养几天芽孢含量高(枯草芽孢杆菌培养步骤)

来源:原点资讯(www.yd166.com)时间:2023-05-07 12:28:27作者:YD166手机阅读>>

芽孢杆菌属于革兰氏阳性菌,好氧,能产生孢子,是一类具有高活性的消化酶系、耐高温、抗应激性的异养菌。芽孢杆菌可以降低水体中硝酸盐、亚硝酸盐的含量,从而起到改善水质的作用。还能与养殖环境中的有害藻类以及各种致病菌竞争,形成优势种群,起到抑制作用。

一、水产常用芽孢杆菌

水产中常用的芽孢杆菌有枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌(枯草芽孢的亚种)、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、丁酸梭菌等。

芽孢杆菌的特性表现在以下几个方面:

1. 对不良环境极强的抵抗能力:芽孢可抗干旱、高热、高酸碱、高渗环境,在恶劣环境下处于休眠状态,遇到适宜的条件又可萌芽生长。待到适宜温度又可以变成细菌。

2. 大部分耗氧:芽孢杆菌大部分严格需氧,少数兼性厌氧或严格厌氧。

3. 体积大:4-10μm,体积比一般病原菌大四倍,有效抑制有害菌繁殖。

4. 生命周期短:芽孢杆菌如枯草芽孢杆菌扩增一倍所需时间为1.5-2小时,来得快去得快,从下塘到衰败生命周期为3-5天。

枯草芽孢杆菌培养几天芽孢含量高,枯草芽孢杆菌培养步骤(1)

▲芽孢杆菌结构示意;枯草芽孢杆菌革兰氏染色

二、芽孢类微生物制剂效果的影响因素

1. 水体溶氧:芽孢类微生物制剂多数为好氧菌或兼性好氧菌(枯草芽孢,复合芽孢),使用这类活菌产品时,必须要保持水体中溶氧含量,才能保证微生物的快速繁殖和对有机杂质的快速分解。

2. 底层溶氧:目前的生物底改主要使用以枯草芽孢杆菌为主的复合微生物制剂,改底的同时需要消耗大量氧气。尤其是养殖的中、后期,池塘底部是污染最严重的区域,底部积累的耗氧因子往往会使底部溶解氧消耗殆尽,虽然用了生物底改,但大部分细菌休眠或没有繁殖,甚至死亡,因此在养殖中后期,常规生物底改推荐配合长效增氧制剂使用,或者使用严格厌氧菌为主的生物型底改,例如以丁酸梭菌为主的生物底改底康泰

枯草芽孢杆菌培养几天芽孢含量高,枯草芽孢杆菌培养步骤(2)

▲不耗氧的生物底改-底康泰

3. pH:在藻类的光合作用下,水体的昼夜pH变化较大,如果在低碱度水体中,pH的波动值更大,芽孢杆菌在微碱性水体中活力最强。池塘底部有机质发酵导致pH过低也会影响芽孢杆菌制剂的效果。

4. 温度:大多数芽孢杆菌在20℃-37℃内有较好的活性,低于10℃时活力较差,一般选择晴天上午,加开增氧机增氧,可使芽孢杆菌产品达到最大效果。

5. 水体的营养水平:芽孢类微生物制剂进入水体后繁殖速度与水体的营养水平有很大的关系。一般认为细菌生长对水体C、N、P的利用率100:5:1。如果水体太瘦,或营养成分单一或失衡,有些异养菌为主的活菌制剂不会大量繁殖,使用活菌几乎无效,此时应向水体中适当补充缺乏的营养才能达到更好的效果。同时适量的氨氮,亚硝酸盐,硫化氢或有机物的存在是必要的,因为细菌只有以此为基础才能获得能量生存繁殖,但过量了也会对微生物产生毒害作用。

三、芽孢类微生物制剂的使用方法

1.调水:以河蟹养殖为例,如水体中有机杂质过多,透明度过低,水草已经隐约被水色遮盖,影响到水草的正常光合作用,则需要使用芽孢杆菌,氨氮、亚硝酸盐偏高时同理使用。

2.改底:中后期使用芽孢类微生物底改,建议按照 “氧-菌-氧”的顺序使用,即第一第四周使用氧化性底改,第二第三周使用微生物底改,养殖后期适当提高使用频率。

3.内服:添加到饲料中给水产动物食用来改善鱼虾蟹的肠胃功能,提高饲料的利润率,改善肉质,促进长生,防病效果很好。主要是通过芽孢杆菌的大量繁殖抑制有害菌的滋生,还有就是能够产生有益代谢产物,例如丁酸梭菌的产物丁酸可有效修复肠道上皮组织细胞,修复肠道。

四、芽孢杆菌的选择

市面上有很多芽孢杆菌制剂产品,以粉剂为主,偶尔也能看到水剂,那么该如何判断?

对于水剂的芽孢杆菌制剂产品,在芽孢杆菌制剂灌装之后,因为是活菌,芽孢还在生长,所以罐装产品容器会有涨气现象。如果产品中的氧气耗尽,活菌大量死亡,水剂芽孢杆菌制剂产品很不稳定,在有选择的条件下,尽量使用粉剂的芽孢杆菌产品。

枯草芽孢杆菌培养几天芽孢含量高,枯草芽孢杆菌培养步骤(3)

▲利生素(复合芽孢);富水美(枯草芽孢

五、芽孢杆菌的正确使用方法

关于芽孢杆菌使用前需不需要活化的问题一直存在争论,通常在试验室要扩培芽孢杆菌,需要控制温度、水分、氧气、培养基四个条件,要用到葡萄糖、淀粉、黄豆粕、硫酸锰、磷酸氢二钾、硫酸镁、硫酸钙、硫酸铵,同时还要搭配吸附载体,如麦麸、沸石粉。如果是工厂化生产,还要对菌种进行提纯复壮,采用发酵罐来进行扩培,连接上增氧设备,并不断搅拌,处在对数生长期的芽孢杆菌,只要停止增氧30秒,菌液的溶氧就可以从饱和变成零。这么多环节的要求,在塘口操作比较困难,所以不建议养殖户去扩培菌液数量。

对于粤海生物的芽孢类产品活化使用方法:把菌种、碳源,水按照1:3:45的比例浸泡4小时左右,浸泡时需全程气泵曝气,其中碳元速可用双倍用量的红糖替代,水需使用井水。

六、芽孢类微生物制剂的使用时的一些误区

1. 扩培时不增氧,密封发酵。有不少养殖户按照EM、乳酸菌的发酵方法使用芽孢类产品,通过该方法得到的发酵液菌种含量极低,效果大打折扣,建议不扩培直接使用。

2. 通过产气来判断芽孢类微生物制剂的好坏。芽孢杆菌遇水并不会出现大量产气的现象,通常该类产品添加了大量酵母菌,芽孢杆菌的菌种含量存疑。

3. 使用芽孢类产品有效果后可以一周不用调水(用其他菌种)。这里重点讲一下,在正常情况下,池塘中菌相具有多样性和复杂性,这是保障池塘水体稳定的一个重要指标,大量补充芽孢杆菌已经破坏了池塘本身的菌相,在芽孢杆菌经过3-5天的繁殖衰败后,池塘的菌相才会缓慢恢复,在这中间会出现一个空白期,会导致有害菌大量繁殖,菌相的变化带动藻相的变化,严重会出现倒藻、转水。使用芽孢杆菌三天以后,建议采取措施补种EM菌种(EM调水王)及碳源(碳元速)直接泼水使用,快速恢复池塘的菌相。

枯草芽孢杆菌培养几天芽孢含量高,枯草芽孢杆菌培养步骤(4)

▲ 恢复菌相组合

芽孢杆菌在水产中的水质改良、疾病预防、体质增强等多方面都有重要作用,科学合理的使用芽孢杆菌可以达到事半功倍的效果,也建议广大养殖户在选择芽孢类产品时选择高含量、大厂品牌产品,最后祝大家养殖成功。

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