《法证先锋3》上映于2011年，主要演员基本都换了，故事还是讲有科学的方法破案，法证部高级化验师布国栋（黎耀祥饰）学识渊博，堪称人肉百科全书。法医科高级医生钟学心（张可颐饰），做事积极投入，曾进修各类型课程，令其工作上往往有出其不意的结果。布国栋和钟学心因工作关系而成为好友，时常并肩作战，甚有默契。二人交谈间常渗进一些科学和医学的专业名词，二人常被揶揄以火星话沟通。

西九龙重案组高级督察凌倩儿（徐子珊饰），擅长策略和部署，与下属相处融洽。西九龙重案组警长李展风（吴卓羲饰）为凌倩儿的得力助手，曾为飞虎队队员，故身手了得，虽家境富裕，却为追求理想投身警界。

法证部科学鉴证主任蒋卓君（陈茵媺饰）是部门的新力军，她常插手查案，而同属科学鉴证主任的何正民（萧正楠饰），因做事按部就班，对蒋卓君的越界举动不表认同，时常阻挠。为此蒋卓君与何正民因各自的原则不同而产生一些磨擦，但渐渐两人在工作中加深了解，关系因此得到改善。法证部科学鉴证主任游健保（蒋志光饰）年纪较长，其人生经验丰富，可说是一位通识达人，又或是人肉掌故王。