４１蝎王。金并的爪牙蝎王在影片中也十分抢眼，他本名叫做麦克唐纳·加根，原本是一名私家侦探，后来下半身和作弊都装备了蝎形装甲，火力凶猛。

４２徘徊者。徘徊者是贯穿《蜘蛛侠：平行宇宙》影片的关键角色，在1610宇宙中变异蜘蛛正是他带来的，迈尔斯也是在他的家中被感染的，同时他与小蜘蛛的关系十分密切，看过电影的朋友们都知道吧。

４３章鱼女士。章鱼女士在最终战中登场，她的真名叫做卡洛琳·特莱纳，她本是章鱼博士的门徒，1995年第一次在《超凡蜘蛛侠 No.406》中登场。

４４墓石，漫威宇宙中知名度算不上高的反派，他患有白化病，在影片中也有登场。这里还有隐藏的彩蛋，为墓石配音的是美国演员马尔文·琼斯三世，他在现实中同样患有白化病。

４５亚伦叔叔。影片中最具戏剧性的人物关系便是迈尔斯与叔叔亚伦·戴维斯，后者明面上是迈尔斯的良师益友，暗地里隐藏了徘徊者的反派身份，在得知迈尔斯是蜘蛛侠后唤醒良知，牺牲了自己保护了侄子。这个设定其实与漫画大相庭径，在原始设定中，亚伦试图控制迈尔斯的能力达到为非作歹，最终被迈尔斯无意中*死，在临死之际还暗示迈尔斯他的父亲有不为人知的另一面。

４６美国著名艺人唐纳德·格洛沃也曾多次表达想要出演蜘蛛侠的心愿，甚至在社交媒体上发起过投票，在他的苦苦哀求下漫威给了他机会。在动画《终极蜘蛛侠》第三季中格洛沃为迈尔斯配音，随后还在《蜘蛛侠：英雄归来》中出演亚伦·戴维斯。而在《蜘蛛侠：平行宇宙》中，迈尔斯走进叔叔的公寓时，电视上能看到格洛沃在《废柴联盟》中饰演的角色，也是对这个梗的回应。

４７《蜘蛛侠：平行宇宙》中对迈尔斯获得超能力的展示含含糊糊，为何这只背上印有42的蜘蛛会让得到超能力？为什么是42？想要知道答案还得翻开漫画。在《终极蜘蛛侠》中，“绿魔”诺曼·奥斯本在蜘蛛身上做实验，迈尔斯的叔叔曾经潜入实验室窃取技术，有一只蜘蛛跳进了他的包中，这正是他带回家的第42号蜘蛛。

４８绿魔在影片中的造型与之前的电影很不一样，巨大化的绿色身躯令人想起绿巨人，其实这个造型参考的是《终极蜘蛛侠》中绿魔的形象。

４９在《蜘蛛侠：平行宇宙》中，许多场景设计与《蜘蛛侠2099》中邪恶的炼金术公司的设定吻合，未来在这个系列电影中除了奥氏集团外，可能还有别的反派组织登场。