分子克隆概述

分子克隆用于组装* DNA 分子并指导其在宿主生物体内的复制，形成多个 DNA 分子。克隆是指复制一个分子以产生具有相同 DNA 分子的细胞群。这种方法常用于扩增含有全基因或任何 DNA 序列（如启动子、非编码序列和随机片段化 DNA）的 DNA 片段。分子克隆是将目的基因 (GOI) 插入到质粒载体中的过程，然后将该载体插入到表达 GOI 编码的蛋白质的细胞中。一旦蛋白质在细胞中得到表达，这种表达即可用于各种不同的研究（如细胞信号传导、形态学或其他方面）。

克隆不仅是制造一个基因或其他细胞成分的拷贝，而且是改变 DNA 序列中的一个基因，然后复制它。为了扩增活生物体中的任何 DNA 序列，该序列必须与复制起点相连，并且能够指导自身和任何相连序列的繁殖（例如：可被用于克隆）。如果对内容感兴趣可以到默克www.sigmaaldrich.cn看具体内容。

分子克隆的重要性/应用

分子克隆可用于以下领域：

• 用于探索蛋白质及其功能。利用* DNA，研究科学家可以指导复制（生产*蛋白），并通过克隆操纵细胞，从而了解更多关于特定蛋白的知识，并将这些知识应用到疾病和病原体等更大规模的研究工作中。1

• 它有助于探索许多不同物种（包括人类和其他动物）的基因组序列，并创造转基因生物，如除草剂抗性植物等。

• 用于细胞周期、基因组组织、基因表达和基因治疗。它也可用于发现新药和合成新的*疫苗。

• 由于其简单性、高成本效益、快速性和可靠性，它成为了临床微生物学中的一个重要工具。该技术的工业应用实现了以抗微生物肽和可用作治疗剂的*细胞因子的形式生产新的抗生素。1

• 利用该技术开发的基因探针在遗传性疾病的早期诊断、法医调查和常规诊断中发挥了重要作用。1

分子克隆过程

任何 DNA 片段的克隆基本上涉及以下步骤：

• 选择克隆载体（例如或或以及宿主物种。有关选择载体的指导帮助，请参阅我们的表达载体选择指南
  

• 载体DNA的制备（例如：，）

• 将* DNA 导入或插入宿主生物体：

• 将 DNA 插入宿主生物体的方式取决于所选择的实验方法（即转化、转导、转染、电穿孔）

• 含有载体序列的生物体的选择

• 筛选具有所需 DNA 插入片段和生物学特性的克隆

关于分子克隆的详细文章可以在中找到。

在分子克隆过程中，面临着各种各样的可以检查的问题。以下是几个可能的原因和建议的解决方案：