（1）无菌持物钳使用方法

1）无菌持物钳（镊）应浸泡在盛有消毒溶液的大口容器内，根据条件亦可使用干燥无菌持物钳（镊）。浸泡液要浸没钳轴关节以上2～3cm或镊子的1/2。每个容器只能放1把无菌持物钳（镊）。

2）取放无菌持物钳（镊）时，应将钳（镊）端闭合。取出时不可触及容器口缘及溶液面以上容器内壁。使用时应保持钳端向下。用后立即放回容器中，并松开关节将前端打开。

3）无菌持物钳（镊）只能用于夹取无菌物品，不能触碰未经消毒的物品。如有被污染或可疑污染时，应重新消毒。

（2）无菌包装打开的方法

1）取出无菌器皿时，先查看外包装上的名称及灭菌日期。

2）将其放在超净台内，解开线绳。

3）用无菌钳取出所需物品，放进超净台。如包装内物品一次用不完，则按原折痕包扎好，并注明开包时间，24小时后须重新灭菌。

（3）无菌容器的使用

1）打开无菌容器时，容器与盖子的接口处用75%酒精消毒，打开盖子，盖子的内面向上，平放于桌上，夹取所需物品后立即盖严。

2）手持无菌容器时（如无菌饭盒），应托住底部，不可触及容器的边缘或内面。

（4）取用无菌溶液：仔细检查核对溶液后，瓶口的边缘处过火焰灭菌，揭开瓶盖，以手夹住瓶盖并握住瓶身，手掌紧贴瓶签，倾斜约45°取用溶液。

若用加样器吸取或加入液体（细胞）时，吸头及加样器杆不能接触容器瓶口及内壁；若要倒出液体，可先倒出少许溶液冲净瓶口，再由原处倒出适量溶液于容器内。

倾倒溶液后瓶口及瓶盖再次过火焰灭菌，盖上瓶盖，并注明开瓶时间。

注意在分装试剂时应尽量小包装，以免反复打开而造成污染。

（5）接种

1）向培养板中加入细胞时，应边加边轻轻振荡细胞混悬液，使每孔加入的细胞量均匀。

2）加样时注意不要打出气泡。