从差异表达蛋白及其调控层面探讨慢性乙型肝炎肝胆湿热证与脾胃湿热证的证候差异
淡丽娟， 柴少竹， 黎桂玉， 苏悦， 邹嘉曦， 文莉
【 摘要】 背景 湿热证是慢性乙型肝炎（ CHB） 的常见证候， 而作为 CHB 的常见证型的肝胆湿热证与脾胃湿热证有湿热共性， 辨证分型较易混淆， 探讨二者证候差异的本质及区分二者的生物学标志物对丰富中医证候现代科学内涵、 提高精准化辨证论治等具有重要意义。 目的 从差异表达蛋白及其调控层面探讨 CHB 肝胆湿热证与脾胃湿热证的证候差异， 并探寻区分二者的潜在客观标志物。 方法 选取 2018 年 1 月—2019 年 1 月中国人民解放军西部战区总医院肝病科门诊、 消化科门诊收治的 CHB 患者 30 例， 其中辨证分型为肝胆湿热证者 15 例（ 肝胆湿热证组） 、 脾胃湿热证者 15 例（ 脾胃湿热证组） ； 另选取同期在中国人民解放军西部战区总医院体检健康者 10 例作为对照组。 采用酶联免疫吸附试验（ ELISA） 检测目标蛋白〔 包括人癌胚抗原相关细胞黏附分子 1（ CEACAM1） 、 单核细胞趋化蛋白 1（ MCP-1） 、 基质细胞衍生因子 1（ SDF-1） 、 人类黏蛋白 2（ ORM2） 、 人膜突蛋白（ MSN） 、 纤维胶凝蛋白 2（ FCN2） 、 血管细胞黏附分子 1（ VCAM-1） 、 胰岛素样生长因子 1（ IGF-1） 、 人神经源性基因座同源缺口蛋白 2（ NOTCH2） 、 人 β - 淀粉样前体蛋白（ β -APP） 、 人乌头酸酶（ ACO1） 、 人山梨醇脱氢酶（ SORD） 、 人乙醛脱氢酶 1 家族成员 A1（ ALDH1A1） 〕 ， 并进行生物信息学分析； 绘制受试者工作特征（ ROC） 曲线以分析差异表达蛋白对 CHB 肝胆湿热证与脾胃湿热证的鉴别诊断价值。 结果 肝胆湿热证组、 脾胃湿热证组患者 CEACAM1、 MCP-1、SDF-1、 ORM2、 MSN、 FCN2、 VCAM-1、 IGF-1、 NOTCH2、 β -APP、 ACO1、 SORD、 ALDH1A1 蛋白表达量均低于对照组（ P<0.05） ； 脾胃湿热证组患者 CEACAM1、 MCP-1、 MSN、 VCAM-1 蛋白表达量高于肝胆湿热证组， SDF-1、ORM2、 FCN2、 IGF-1、 NOTCH2、 β -APP 蛋白表达量低于肝胆湿热证组（ P<0.05） 。 以 P<0.01 为标准进一步筛选肝胆湿热证与脾胃湿热证差异表达蛋白， 则上述 13 种差异表达蛋白仅 CEACAM1、 SDF-1、 MSN、 IGF-1 入选， 其中脾胃湿热证组患者CEACAM1、 MSN蛋白表达量高于肝胆湿热证组， SDF-1、 IGF-1蛋白表达量低于肝胆湿热证组（ P<0.01）。生物信息学分析结果显示， CHB 肝胆湿热证与脾胃湿热证之间 CEACAM1、 MCP-1、 SDF-1、 ORM2、 MSN、 FCN2、VCAM-1、 IGF-1、 NOTCH2、 β -APP 蛋白存在较紧密的关联， 且这 10 种差异表达蛋白共同参与多条信号通路。 ROC曲线分析结果显示， CEACAM1、 SDF-1、 MSN 鉴别诊断 CHB 肝胆湿热证与脾胃湿热证的曲线下面积分别为 0.73〔 95%CI（ 59.50， 98.30） 〕 、 0.72〔 95%CI（ 59.50， 98.30） 〕 、 0.70〔 95%CI（ 51.90， 95.70） 〕 ， 灵 敏 度 分 别 为 86.67%、86.67%、 80.00%， 特异度分别为 56.25%、 56.25%、 56.25%。 结论 CHB 肝胆湿热证与脾胃湿热证之间存在客观差异，CEACAM1、 SDF-1、 MSN、 IGF-1 是二者主要差异表达蛋白； CHB 肝胆湿热证与脾胃湿热证证候差异的生物学机制可能与核因子（ NF） -κ B 信号通路、 晚期糖基化终末产物（ AGE） - 晚期糖基化终末产物受体（ RAGE） 信号通路介导的氧化应激反应等有关， 而 CEACAM1、 SDF-1、 MSN 可作为区分 CHB 肝胆湿热证与脾胃湿热证的潜在客观标志物。
【 关键词】 乙型肝炎； 证候； 肝胆湿热； 脾胃湿热； 蛋白质类； 生物信息学
【 中图分类号】 R 512.62 【 文献标识码】 A DOI： 10.12114/j.issn.1007-9572.2020.00.572
淡丽娟， 柴少竹， 黎桂玉， 等． 从差异表达蛋白及其调控层面探讨慢性乙型肝炎肝胆湿热证与脾胃湿热证的证候差异［ J］ ． 中国全科医学， 2020． ［ Epub ahead of print］ ． ［ www.chinagp.net］