1951年，于黛琴调至长春电影制片厂，成为一名电影演员，先后两次到抗美援朝前线进行慰问演出。

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1954年，于黛琴调往北京电影制片厂当演员。在北影期间，他先后在《结婚》中饰演了中年妇女、《十三陵水库畅想曲》中饰演了小杨，以及参演了《猛河的黎明》《葡萄熟了的时候》等电影。

1957年，于黛琴考入中国青年艺术剧院，做了一名话剧演员。

在青艺，于黛琴参演过数十部剧目，扮演的主要角色有《李双双》中的李双双、《保尔·柯察金》中的丽达、《刘介梅》中的介梅妻、《夺印》中的烂菜花、《龙马精神》中的秀英、《降龙伏虎》中的李玉桃、《红鼻子》中的叶太太、《曙光》中的岳灵姑、《撩开你的面纱》中的小川惠美、《威尼斯商人》中的鲍希霞、《两颗金刚》中的日本妇女等。

其中，于黛琴饰演李双双的话剧《李双双》，1964年获优秀话剧演出奖，曾与电影中饰演李双双的张瑞芳，并称“南北李双双”。

电影表演方面，之后的八九十年代，于黛琴先后参演过《赣水苍茫》《秋瑾》《黑蜻蜓》《廖仲恺》《金匾背后》《九千六百万双眼睛》《飞越人生》《赚它一千万》等电影。

进入21世纪，于黛琴还先后在《生存之民工》《爱情呼叫转移》《外乡人》《徐悲鸿》《过年好》《鬼吹灯之黄皮子坟》等影视剧中出演了角色。