6.1.2 LG-MS

LG-MS对样品的前处理与HPLC大致相同，但具有较高的灵敏度和较好的重复性，使用MS作为检测器，在一定程度上提高了灵敏度及抗干扰能力，降低了检出限，可以在定性的同时对样品进行定量，因此准确度高、误判的可能性小。

目前LC-MS和LC-MS/MS是定性检测三聚氰胺的最主要方法，国内外相关研究报道较多。Andersen等报道了鱼、虾等动物产品中三聚氰胺和三聚氰酸的LC-MS/MS检测。方法是使用酸性乙腈提取，二氯甲烷去脂，混合阳离子交换SPE柱浓缩富集，采用同位素稀释方法进行定量，平均回收率为63.8%，相对标准偏差为21.5%。Lv等建立LC-MS/MS法检测羔羊肝脏、肾脏组织及血清中的三聚氰胺和三聚氰酸残留。结果表明，在羔羊组织中三聚氰胺和三聚氰酸的检测限分别为10ng/g和20ng/g；在血清中分别为30ng/mL和40ng/mL。赵玉娟等报道了检测饲料中三聚氰胺的LC-MS/MS方法。饲料经10g/L三氯乙酸溶液提取和22g/L乙酸铅溶液沉淀蛋白质，过混合型阳离子交换柱净化，离心后用0.45μm滤膜过滤，用LC-MS/MS分析测定，以三聚氰胺母离子126.9m/z、子离子67.5m/z和84.6m/z定性和定量待测物。饲料样品加标回收率为84.5%，检测限为0.01μg/L，相对标准偏差6.5%。黄优生等建立了快速测定鸡蛋中三聚氰胺残留的HPLC-MS/MS方法。采用阳离子扫描方式（ESI＋）进行分析，以母离子126.9m/z、子离子67.9m/z和84.8m/z定性和定量待测物（图7-14）。该法检测限可达3μg/kg，定量限为10μg/kg，添加样品回收率为87.0%~96.8%。

但是由于三聚氰胺及其同系物为强极性的小分子化合物，在C18键合相色谱柱中几乎无保留。常通过添加离子对试剂，形成反相离子对色谱来解决这一问题，但添加高离子强度的缓冲盐和非挥发性的离子对试剂，不适用电喷雾离子源分析，且反相离子对色谱难以在一次运行中同时分离酸性和碱性物质。测定三聚氰胺常用磺酸基与C18混合填料色谱柱，这种填料色谱柱利用了阳离子交换与反相保留的机理，增加了碱性化合物与极性化合物的保留，它对三聚氰胺类阳离子化合物有很强的保留，但对三聚氰酸则不能保留。对于极性化合物而言，理想的解决方案是采用亲水作用色谱（HILIC）。HILIC机理是极性的待测物在相对非极性的流动相和极性的固定相之间进行分配。在HILIC中，水被吸附在固定相的表面，主要依靠分配作用分离，而非吸附作用。Andersen等用HILIC柱进行LC-MS/MS分析，可对鱼和虾组织中三聚氰胺残留进行定性和定量分析，其检测限为3.2μg/kg。Heller等建立了HILIC/LC-MS/MS法同时检测动物饲料中的三聚氰胺和三聚氰酸。将两性离子对添加到HILIC柱中，在pH梯度变化时可很好地将三聚氰胺和三聚氰酸分离，最低检测限为0.5μg/g。

此外，利用LC-MS对三聚氰胺及其同系物的多残留检测也有报道。何君等建立同时检测大鼠血浆和组织中三聚氰胺和三聚氰酸含量的方法。在选择色谱条件时，在流动相中加入离子对试剂，采用体积比为9∶1的乙腈水溶液，并混有5mmol/L的乙酸铵和0.1%乙酸的流动相，以改善其在反相柱上的保留行为，同时加入甲酸提高离子化效率，使得三聚氰胺在色谱柱上能够较好保留；MS条件采用ESI离子源、SIM模式，并采用按运行时间段切换正、负离子模式，三聚氰胺采用正离子模式，三聚氰酸采用负离子模式，得到了较好的色谱峰和较高的灵敏度。简龙海等为避免使用ESI源产生基质抑制效应而导致灵敏度差的问题，采用APCI源同时进行尿液中三聚氰胺和三聚氰酸的测定，基质抑制效应可明显改善，三聚氰酸和三聚氰胺的灵敏度明显增强。蔡勤仁等建立了猪组织中三聚氰胺、三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺及环丙氨嗪的LC-MS/MS检测方法。进行了色谱条件选择和MS条件优化试验，结果表明，Waters Atlantis HILIC柱分离效果最好，并通过洗脱梯度的调节，将正负两组离子分开，采用正负离子切换的扫描方式（表7-7），灵敏度和峰形良好，方法检出限为2μg/kg，回收率为94.2%~99.9%，相对标准偏差为3.8%~7.5%。